環孢霉素內標是將一定重量的環孢霉素作為內標物加到一定量的被分析樣品混合物中，然后對含有內標物的樣品進行色譜分析，分別測定內標物和待測組分的峰面積（或峰高）及相對校正因子，按公式即可求出被測組分在樣品中的百分含量。內標法是色譜分析中一種比較準確的定量方法，尤其在沒有標準物對照時，此方法更顯其*性。

 

　　定義：將一個已知質量的純物質，加入至待測樣品溶液中，以此純物質的量為標準，對比測定待測組分的含量，該純物質稱為內標物。

　　選擇要求：

　　1、原樣品中不含組分；

　　2、與待測物保留時間應接近，但不重疊；

　　3、為高純度標準物質，或含量已知物質；

　　4、在給定色譜條件下具有一定化學穩定性。

 

　　影響因素：

　　影響內標和被測組分峰高或峰面積比值的因素主要有化學方面的、色譜方面的和儀器方面的三類。

　　由化學方面的原因產生的面積比的變化常常在分析重復樣品時出現。

　　化學方面的因素包括：

　　1、內標物在樣品里混合不好；

　　2、內標物和樣品組分之間發生反應，

　　3、內標物純度可變等。

　　對于一個比較成熟的方法來說，色譜方面的問題發生的可能性更大一些，色譜上常見的一些問題對絕對面積的影響比較大，對面積比的影響則要小一些，但如果絕對面積的變化已大到足以使面積比發生顯著變化的程度，那么一定有某個重要的色譜問題存在，比如進樣量改變太大，樣品組分濃度和內標濃度之間有很大的差別，檢測器非線性等。進樣量應足夠小并保持不變，這樣才不致于造成檢測器和積分裝置飽和。如果認為方法比較可靠，而色譜柱看來也是正常的話，應著重檢查積分裝置和設置、斜率和峰寬定位。對積分裝置發生懷疑的最有力的證據是：面積比可變，而峰高比保持相對恒定。